细胞培养常见问题分析

[2011/6/5]

细胞常见问题分析

1、冷冻管应如何解冻？

取出冷冻管后，须立即放放37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可以超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另外冻管由液氨桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。

2、可否使用与原先培养条件不同之培养基？

不能。每一细胞株均有其特定使用自己适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同的之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。

3、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？

不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产品极大的影响。来自不同特种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

4、悬浮性细胞应如何继代处理？

一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。

5、欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？

欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg（约1，000rpm），5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡。

6、如果细胞发生微生污染时，应如何处理？

加入相应抗生素。直接灭菌后丢弃。

7、各种细胞培养用的dish，flash是否均相同？

不同厂牌的dish或flash，其所coating的polymer不同，制造程序亦不同，虽对大部分细胞没有太大之影响，惟少数则可能因使用厂牌不同之dish或flask而有显著之生长差异。

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