生物医学显微摄影操作步骤

[2011/10/13]

　　生物显微摄影(Microphotography)是利用摄影装置来拍摄显微镜视野中所观察到的物像。在生物医学方面，主要用于对正常细胞或病变细胞的显微形态学研究记录。具体操作步骤如下：

　　一准备步骤

　　拍摄前作以下预备工作，调整显微镜至最佳状态。

　　1.光路合轴使光轴与光束处于同一轴线上。

　　2.柯勒氏照明使观察的视野获碍均匀而又充分的照明;防止杂散光对照相系统产生影响。

　　3.物镜与目镜合理组合依标本的不同和显微摄影要求，物镜与目镜的组合有一定规范。

　　4.调整视场光阑和孔径光阑使两者与所用物镜的数值孔径相等，所得的分辨力最高;视场光阑一旦调好，不要再动，而孔径光阑可随物镜数值孔径的更换，做相应的调整。

　　二拍摄步骤

　　拍摄是显微摄影系列操作中的关键环节，在镜检观察中，发现需要摄下的影像应即时拍照。

　　1.开启相机后盖，安装胶卷于照相机内。

　　2.打开显微镜照明装置的电源开关，将亮度调至适当。

　　3.依个人的视力，调整摄影目镜调焦环至“井”字线清晰。

　　4.放一片需要拍摄的标本载玻片于载物台上。在低倍镜下选好要拍摄的核型或细胞结构，再转换到油镜下，聚焦标本细节，准备拍照。

　　5.按下曝光按钮，曝光按钮亮表示曝光开始进行，熄灭表示曝光完毕。

　　6.拍摄记录

　　三胶片冲印步骤

　　感光胶片在拍摄完毕后，需尽快在暗室中冲洗和晒印，其方法和普通照像相似。

　　1. 把胶片装入显影罐中(切勿粘在一起)先用清水冲洗，排除气泡.然后再把水倒掉，这有利于显影液的快速均一作用。

　　2. 从顶部罐口注入预先配好的约250ml D-72式显影液。20℃显影4～12分钟。

　　3. 显影中轻轻摇影罐，使胶片表面充分受显影液作用，显影完毕，迅速倒出显影液。

　　4. 立即注入250ml预先配好的SB—I式停影液，停显时间为10秒，倒出停影液，随之加入250ml的F一5式酸性坚膜定影液，20℃定影15分钟。取出胶片流水冲洗30分钟以上。

　　5. 将胶片挂起，用脱脂棉轻轻吸掉胶片表面过多的积水，晾干。

　　6. 晾干后用放大机的胶片夹子夹住胶片，药膜面朝下，聚焦取景，然后在红灯条件下，用压纸板压住所需号放大像纸，药膜面向上.进行曝光(适当的曝光时间要经试验后决定)。

　　7. 曝光后的像纸，浸入D-72显影液中，然后用竹镊子不时地夹住像纸翻动，直到显影适度为止。

　　8. 显影合适后立即移到SB-I式停影液中，漂洗10～20秒，再浸入定影液中处理15分钟，取出在流水中冲洗60分钟左右。

　　9. 水洗后，放在电热上光机上烘干;裁边，装入有说明的纸袋内保存。

上一篇：冷冻干燥机分类

下一篇：显微摄影操作的重要注意事项