高效液相色谱法及其与气相色谱法的区别

[2012/3/31]

　　高效液相色谱法：

　　特指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。它在经典色谱理论的基础上，采用了高压泵、化学

　　键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实

　　验技术建立的一种液相色谱分析法。

　　高压：150-350*105Pa

　　高效：大于30000塔板/米

　　高灵敏：10-9g(紫外检测)、10-11g(荧光检测)

　　液相色谱仪与气相色谱仪的区别：

　　1.分析对象的区别

　　GC：适于能气化、热稳定性好、且沸点较

　　低的样品;但对高沸点、挥发性差、

　　热稳定性差、离子型及高聚物的样

　　品，尤其对大多数生化样品不可检测

　　占有机物的20%

　　HPLC：适于溶解后能制成溶液的样品(包括

　　有机介质溶液)，不受样品挥发性和

　　热稳定性的限制，对分子量大、难

　　气化、热稳定性差的生化样品及高分

　　子和离子型样品均可检测

　　用途广泛，占有机物的80%

　　2.流动相差别的区别

　　GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用

　　力，只与固定相有相互作用。

　　HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用

　　力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起

　　正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改

　　变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当

　　选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相

　　也可以增大分离选择性。

　　3.操作条件差别

　　GC：加温操作

　　HPLC：室温;高压(液体粘度大，峰展宽小)

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