在HPLC分析中死时间Tm的测量

[2012/11/10]

  在HPLC分析中,死时间Tm的测量是一个比较困难的问题,这也直接影响了高精度kovats保留指数在HPLC中的应用。死时间表示了一个在高效液相色谱固定相上未被滞留组分的保留时间,由于高效液相色谱立法的多样性,很难找到像气相色谱那样选择空气或甲烷为测量死时间的通用探针,其实平时分析时用这个死时间的意义不大,我觉得你知道就行!但我还是告诉大家如何来测。

  1.由色谱柱的结构参数进行计算

  Tm=(柱长度*柱截面积*总孔率)/流动相流速

  其中柱长度为cm,柱截面积为cm2,总孔率(对全多孔固定相为0.84,对化学我键合和离子交换为0.75),流速cm3/s

  2.用色谱柱的操作参数进行计算

  Tm=(柱阻抗因子*流动相动力粘度*柱长度的平方)/(柱压力降*固定相粒径)

  3.依据经验公式计算

  (1)对全多孔固定相

  Tm=(柱长度*柱内径的平方)/(1.5*流速)

  (2)对非多孔固定相

  Tm=(柱长度*柱内径的平方)/(3.0*流速)