透析袋使用方法

[2013/7/1]

　　透析袋的使用方法透析原理

　　透析是指溶质从半透膜的一侧透过膜至另一侧的过程，任何天然的(如腹膜)或人造的半透膜，只要该膜含有使一定大小的溶质通过的孔径，那么这些溶质就可以通过弥散和对流从膜的一侧移动到膜的另一侧。

　　透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

　　人体内的毒物包括代谢产物，药物，外源性毒物，只要其原子量或分子量大小合适，就能够通过透析清除体外。其基本原理是弥散和对流。弥散就是半透膜两侧液体各自所含溶质浓度梯度及它所形成的不同渗透浓度，溶质从浓度高的一侧通过半透膜向浓度低的一侧移动。对流也称超滤，是指溶质和溶剂因透析膜两侧的静水压和渗透压梯度的不同而跨膜转运的过程。

　　自ThomasGraham1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。

　　透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

　　透析袋的使用方法

　　使用前处理：

　　1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。

　　2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中将透析袋煮沸10分钟。

　　3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。

　　4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。

　　5.冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。

　　6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。

　　透析膜 (前处理方法如下)：

　　1. 戴手套把透析膜剪成适当长度，浸在蒸馏水中 15 min 泡软。

　　2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中，并加热至 80℃，一边搅拌至少 30min。

　　3. 换到 10 mM Na2•EDTA 中浸泡 30 min，以新鲜的 EDTA 同样方法处理三次。

　　4. 再用 80℃ 蒸馏水洗 30 min，然后换到 20% 酒精中，放在 4℃冰箱中保存。

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