PCR 各种缓冲液的配方

[2013/10/29]

  PCR 各种缓冲液的配方

  电泳缓冲液

  50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 终浓度配制1L溶液

  成分 各成分的用量

  2mol/L Tris碱 242g

  1mol/L 冰乙酸 57.1 ml

  EDTA (pH=8.0) 18.622g (200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0))

  水 补足1L

  5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

  成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量

  445 mmol/L Tris碱 54g

  445 mmol/L 硼酸盐 27.5g 硼酸

  10 mmol/L EDTA 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)

  水 补足1L

  染料

  1%溴酚蓝(bromophenol blue)

  加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

  1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)

  溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。

  10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)

  小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。

  凝胶上样液(gel loading solutions)

  6×碱性凝胶上样液(室温贮存)

  成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

  0.3 N 氢氧化钠 300ul 10N 氢氧化钠

  6 mmol/L EDTA 120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

  18%聚蔗糖(400型) 1.8g

  0.15%溴甲酚绿 15mg

  0.25%二甲苯青FF 25mg

  水 补足到10ml

  6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

  成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量

  0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝

  0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF

  5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

  15%聚蔗糖(400型) 1.5g

  水 补足到10ml

  6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

  成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

  0.25%溴酚蓝 2.5ml 1%溴酚蓝

  0.25%二甲苯青FF 2.5ml 1%二甲苯青FF

  15%聚蔗糖(400型) 1.5g

  水 补足到10ml

  6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)

  成分及 终浓度配制10ml溶液各成分用量

  0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝

  0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF

  5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

  50%甘油 3ml

  水 3.9ml

  6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

  成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

  0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝

  0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF

  5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

  40%聚蔗糖 4g

  水 补足到10ml

  10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)

  成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量

  0.2%溴酚蓝 20mg

  0.2%二甲苯青FF 20mg

  200 mmol/L EDTA 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

  0.1%SDS 100ul 10% SDS

  50%甘油 5ml

  水 补足到10ml