什么是流式细胞技术

[2014/11/10]

　　流式细胞技术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。

　　流式细胞仪的基本结构和工作原理：流式细胞仪由三部分构成 1.传感系统，包括样本递送系统、样品池、检测系统、电子传感器和激光源等;2.计算机系统;3.电路、光路和水路系统，有电源、光学传导和滤片、鞘液循环和回收部分等。流式细胞仪的工作原理是使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池，同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表前向散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号，经计算机处理形成相应的点图，直方图和加三维结构图像进行分析。用于FCM的样本是单细胞悬液，可以是血液、悬浮细胞培养液、各种体液、新鲜实体瘤的单细胞悬液以及石蜡包埋组织的单细胞悬液等。

　　样本制备的基本原则：1.使各种液体和悬浮细胞样本新鲜，尽快完成样本制备和检测;2.针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化或EDTA处理，以清除杂质，使粘附的细胞彼此分离而形成单细胞状态;3.对新鲜实体瘤组织可选用或联用酶消化法，机械打散法和化学分散法来获得足够数量的单细胞悬液;4.对石蜡包埋组织应先切成若干40-50um厚的蜡片，经二甲苯脱蜡到水后，再用前述方法制备单细胞悬液;5.单细胞悬液的细胞数不应少于10个。

　　流式细胞技术的应用：1.其测定细胞内DNA的变异系数最小，一般在2%以下;2.能准确地进行DNA倍体分析;3.借助于荧光染料进行细胞内蛋白质和核酸的定量研究;4.快速进行细胞分选和细胞收集;5.医学应用：免疫功能研究各种干细胞的检测，癌症病人的多药耐药性，细胞功能及代谢动力学研究，血小板分析(心血管疾病)，流式细胞术与分子生物学研究。

上一篇：光度计/照度计的基本概念

下一篇：基因技术的其他应用