细胞冻存方法

[2014/12/31]

　　1.细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。

　　2.计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×106/ml，离心去上清，吸入离心管中。

　　3.冻存液：先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。

　　4.分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。

　　5.封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳，末端扎有小牌，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。
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