简单操作这五个步骤巧去牛血清脂肪酸

[2015/3/12]

一、溶解：取适量的牛血洁白蛋白提取物，溶解于10倍的蒸馏水中，溶解温度在23~27℃。用浓度为0.2N的HCl，调治PH至3~3.5。

二、分析：充实溶解后的溶液牛血洁白蛋白移至冰水殽杂物中举行冰水浴，同时连续搅拌，维持30min。

① PH为3~3.5 ② 活性炭用量为5~6%

三、吸附：参加5%的活性炭，混匀，混悬液将混悬液移至冰水殽杂物中举行冰水浴，同时连续搅拌，维持1小时。过滤，滤渣采取后再利用。冰水殽杂物的温度为0~4℃

四、浓缩：滤液用0.2N的NaOH调治PH值至7.0，然后用20000分子量以下的超滤器举行超滤浓缩。

五、冻干：将浓缩液按冻干曲线冻干，即将超滤后的浓缩液敏捷冷冻至-40℃，连续1小时左右，升到-25℃，连续10～20小时，再迟钝升温至0℃，维持1~4小时，升温至生存温度20℃，分装为成品。

牛血清在细胞培养实验中的分析

1.细胞生长速度迟钝，长满单层时间长；从同一细胞瓶中分出两瓶细胞，用同一种作育液，分别参加10%的比较血清和待检血清，在雷同条件下作育72小时，会出现比较血清长满单层，而待检血清约莫只有60~70%，这种血清就不得当用来大范围作育细胞。

2.细胞传代后形态不正常，细胞状态产生变革；由于血清的质量问题，使本来状态正常的细胞经传代后形态会变差；好比：细胞瓶里会出现一些蠕动的小黑点(并非污染)，大概细胞外貌形成一层油状包围物；细胞的表面变得暗昧，细胞之间的间隙被血清中的蛋白颗粒添补，从而影响细胞向四周扩展生长。