细胞脂质过氧的测定

[2015/12/31]

　　(一)原理：细胞受到氧化性损伤时，脂质过氧化产物丙二醛(MIZ)A)生成量增多，借此可放映受试物或毒物对细胞损伤的程度。

　　(二)材料：
　　1．24孔培养板培养的待测细胞与对照组细胞。
　　2．TBA-TCA-HCl溶液用0.125mol／L HCl配制16.8％TCA溶液，即为TCA-HCl溶液。将41．6mg硫代巴比妥酸(TBA)溶于．10ml TCA HCl溶液中，即为TBA-TCA-HCl溶液。

　　(三)方法：将细胞刮下来，连同培养液一起经超声或反复冻融使细胞破碎，混匀后取0.3ml，加入2ml TBA-TCA HCl溶液，80℃水浴15min，3000r／min离心10min，取上清液在分光光度计535nm处比色。

　　(四)结果与分析：
　　计算受试物组细胞脂质过氧化产物的相对生成量(％)。
　　细胞脂质过氧化产物的相对生成量越高，则细胞毒性越低，细胞脂质过氧化产物的相对生成量越低，则细胞毒性越高。

　　(五)注意事项：如果吸光度值太低，可将几个复孔的细胞合在一起进行测定，或改用更大的培养器皿培养细胞；也可半量测定，リンク： http://web.sgihara.comナイキ通販ナイキエアジョーダン激安モンクレール通販即取细胞裂解液0．15ml，加1ml TBA—TCA—HCl溶液。