台式高分辨率质谱系统快速鉴定药物杂质

[2017/2/9]

前言
杂质分析对于药物的研发至关重要1。在研究过程中,杂质谱信息能帮助药物化学家优化合成路线和避免潜在的有毒杂质。在开发过程中,当大量母体化合物存在时,鉴定和表征痕量杂质至关重要,从而促进了高分辨率、高灵敏度和高扫描速度的HR-MS 仪器和智能化结构鉴定软件的发展。
 
为了展示HR-MS 在杂质分析和结构鉴定方面的能力,本文选用了市售药物奥美拉唑。本研究采用了赛默飞世尔科技的Q Exactive 台式Orbitrap 质谱仪和数据处理软件Mass Frontier 来快速分析和鉴定奥美拉唑中杂质的结构。
 
方法
材料与试剂
奥美拉唑(CAS# 73590-58-6)购自Sigma-Aldrich,产品号O104-100MG。
乙腈和水来自Fisher Scientific
乙酸铵购自Sigma-Aldrich,产品号73594-25G-F。
甲酸购自Sigma-Aldrich,产品号33015-500ml。
 
样品前处理
奥美拉唑溶液(0.5 mg/mL)配制在1:1 乙腈/ 水混合溶剂中。
 
HPLC 方法
色谱分离采用Ultimate3000 UHPLC 系统。
色谱柱:Hypersil GOLD 柱,2.1mm×150mm,粒径3 μm.
柱温:35 ℃,流速:0.5 mL/min,进样体积:8 μL
流动相:A - 水;B - 乙腈;C -100 mM 乙酸铵,用乙酸调节pH 值到5
 
质谱方法
质谱分析采用 Q Exactive 质谱仪的电喷雾正离子模式。在70,000 和 35,000 分辨率FWHM@m/z 200 下分别采集高分辨全扫描一级质谱数据和数据依赖Top3 二级质谱数据。
 
离子源条件:
离子化模式:正离子ESI
离子源:HESI-II
鞘气流速:45 单位N2
辅助气流速:10 单位N2
喷雾电压(KV):+3.5
毛细管柱温度(℃):320
S-lens RF 水平:50.0
加热器温度(℃):400
 
Q Exactive 方法参数:
AGC 目标(全扫描):3e6
AGC 目标(MS/MS):1e5
NCE:30,35% 阶梯变化
扫描范围(全扫描MS):180 到1200 amu