影响种子罐培养的主要因素介绍

[2017/4/14]

影响种子罐培养主要因素包括：营养条件，培养条件，染菌控制，扩培级数确定以及接种量的确定。

1培养基

培养基关系营养的获取，对微生物的生长、繁殖、酶活性与产量均有直接影响。培养基可分为C/N基础生长营养，无机盐渗透压控制，微量元素维系组成，以及pH酶活性调节系统。

培养基的要求以组成简单，来源丰富，价格便宜，取材方便为宜。

注：
A种子罐最后一级当与生产罐一致，此时前罐已建立发酵所需酶系，新环境条件下不需要重新构建；
B种子罐培养基应当增加N用量，且无机氮的增量比例要大一些；
C菌种进级之后由于设备差异（罐型、搅拌形式、转速等），培养基配比需要重新根据实验调整

2种龄、接种量

种龄要求：对数生长期移种，这是因为嫩种和老种转罐后启动速度均较慢，会导致发酵周期增加且产量低。
接种量：接种量影响新环境下的迟滞期长短，这是因为接种量伴随细胞分裂繁殖所需的RNA等代谢物，此类物质含量多可快速进入对数生长期，故接种量与新环境下的迟滞期成反比。

3温度

前期看温度，后期看溶氧。

任何微生物都有其最适温度范围，如下

生物学范围内，每升高10℃，微生物生长速度可提升一倍，温度直接影响细胞代谢酶系。

在最适范围之内，提高对数生长期的前期的温度有利于菌体的合成，对数生长期后期溶解氧对菌体合成速率影响更大，此时需要提升通气量及搅拌等。

4 pH影响

阴离子（醋酸根，磷酸根）被吸收或氮源被利用后产NH3，使pH升；
阳离子（NH4+,K+）被吸收或有机酸积累使pH降；
高C培养基pH往低pH移动；
高N培养基pH往高pH移动。
调节pH三种方式：a酸碱溶液；b缓冲液；c缓冲剂（酸性或碱性盐）

5通气搅拌

通气量、罐压、搅拌共同决定了当前的溶氧状态，只有当溶解氧大于当前的BOD时，今天才能正常生长，移种之后菌体进入对数生长期，分裂繁殖速率指数增长，当此时应当交替调节通气量和搅拌功率，以使DO达到菌体所需标准，一旦无法满足菌体可适当降温，降低菌体耗氧速率，此时菌体分裂生长效率降低但不至于缺氧畸形或自溶。

6种子罐级数确定

技术越少，越不易染菌，级数由菌种性质确定，如生长速率，对数期菌体浓度，孢子的发育水平等，在不断的优化调试之后，应当尽可能减少扩培种子罐级数，但需以不影响或较少影响生产罐迟滞期的增加及对数生长期生长速率为前提。

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