如何用离心机进行两虫的检测

[2017/5/15]

贾第鞭毛虫与隐孢子虫(简称“两虫”)是两种严重危害饮用水水质安全的病原微生物。“两虫”具有个体微小,致病量低、感染途径和方式简单,流行分布广泛的特点。2006年我国《生活饮用水卫生标准》增加了“两虫”检测,规定每10L小于1个孢囊或卵囊。今天小编为大家介绍如何用离心机来进行两虫的检测。

首先要进行接种和样品的淘洗和浓缩,然后开始离心。

a. 离心机应放在牢固的工作台或地板上,尽量减少晃动。 

b. 平衡对称的离心管,和适配器、离心桶一起平衡,重量差别不超过0.5g, 尽量减少摆动。注意:如果离心管不被平衡则会产生额外的震动,影响到目标物的沉淀。  

c. 设置离心机参数2000g,15min。样品在离心机中自然惯性停止,不可使用刹车系统急停。  

d.用真空泵或蠕动泵吸取离心管中的上清液,在进口处装一个移液器以减少进口的真空力度。最终留取5-8ml(可预先在管上做好标记)。流速控制在200±20ml/min。注意把移液管放到液面中心,接近液面处上吸取上清液,以减少沉淀的损失。 

e. 将离心管中的剩余的浓缩液在涡旋混合器上混匀20秒。  

f. 用缓冲液润洗移液器将所有液体转移至L型试管中。(注意:移液器需要用缓冲液润洗下,是为了避免移液管壁因干燥而将两虫挂壁。)  

g. 使用纯水清洗两次移液管(如剩余体积为7ml,则每次1.5ml),并将清洗 液移入同一个L型试管中,每次冲洗后都要停留20秒再移出液体。

离心机离心和移液结束后,再进行两虫的捕获和染色,最后分析免疫荧光检验的结果就可以判断两虫的情况了。