饲料中粗蛋白的测定过程解析

[2010/11/17]

1.粗蛋白的测定原理:
凯氏法测定试样中的含N量,即在催化剂作用下,用H2SO4破坏有机物,使含N物转化成(NH4)2SO4,加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出N含量,将结果乘以换算系数6.25,计算出CP含量。
2.粗蛋白的测定材料与器具:
粗蛋白的测定需要使用到的仪器有:H2SO4、混合催化剂、NaOH、硼酸、混合指示剂、HCl标准液、蔗糖、硫酸铵、硼酸吸收液
粗蛋白的测定仪器设备:粉碎机、分样筛、分析天平、KDN-08A消化炉、滴定管、KDN-04A全自动定氮仪、锥形瓶、容量瓶、消煮管
3.粗蛋白的测定方法步骤
1、试样的消煮,称取试样0.5g,准确至0.0202g,放入消煮管中加入6.4g混合催化剂与试样混合均匀,再加入12ml H2SO4将消煮瓶置于电炉上加热,开始小火,待样品焦化、泡沫消失后,再加强火力(360-410℃)直至透明的蓝绿色,然后再继续加热至少2h。
2、NH3的蒸馏
将试样消煮液冷却,加入20ml蒸馏水,转入100ml容量瓶中,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,作为试样分解液。将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有20ml硼酸吸收液和2滴混合指示剂的锥形瓶内。蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴,硫酸数滴,在蒸馏过程中保持此液为橙红色,否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10-20ml注入蒸馏装置的反应室中,用少量蒸馏水冲洗进样入口,塞好入口玻璃塞,再加入10ml氢氧化钠溶液,小心提起玻璃塞使之流入反应室,将玻璃塞塞好,且在入口处加水密封,防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面,再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均需流入锥形瓶内,然后停止蒸馏。
3、滴定
蒸馏后的吸收液用HCl标准溶液滴定,溶液由蓝绿色变为灰红色为终点。
4、空白测定
称取蔗糖0.5g代替试样进行空白测定
5、计算
CP=
V2:滴定试样时所需标准溶液体积ml
V1:滴定空白时,所需标准溶液体积ml
C:盐酸标准溶液浓度mol/l
M:试样质量 g
0.0140:与1mol HCl标准溶液相当的以g表示的N的质量。
6.25:N换算成CP的平均系数。
6、重复性
每个试样的平行样进行测定,以其算术平均什为结果。
当粗蛋白质在25%以上时,允许相对偏差为1%;
当粗蛋白质在10%~25%之间时,允许相对偏差为2%;
当粗蛋白质在10%以下时,允许相对偏差为3%。
      饲料是家畜成长的营养来源,饲料中蛋白质含量的高低,直接决定了家畜的质量高低。因此,饲料中蛋白质的含量测定是一个很重要的步骤。而蛋白质存在于一切动植物体中,是一切生命活动的物质基础。家畜从饲料中摄取蛋白质及其分解产物,以组成自身的蛋白质,因此,饲料中蛋白质含量的分析就成为评价饲料营养价值的主要指标。

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