摇瓶机在菌种培养中的使用方法及注意事项

[2019/7/30]

摇瓶机在菌种培养中的使用方法及注意事项

 

在进行摇瓶机试验前,首先检查摇瓶机各部件,检查气源、电源、管路、压力表、密封等是否正常,特别强调的是摇瓶机做为精度,高科技的仪器,摇瓶机每个过程都由精准的程序控制,所以要求实验人员在操作前必须对摇瓶机的各个按钮,流程熟练掌握,详细阅读摇瓶机说明书,及实验室仪器安全操作规程。掌握了摇瓶机的基本操作要领后,逐步按以下步骤进行摇瓶机细菌培养试验:

 

第一步:摇瓶机复苏:根据所培养的细菌选择适宜的培养基,大部分细菌在lb培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌,然后转移到10毫升中试管(放入4毫升液体培养基)中,一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜(温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度)。

 

第二步:摇瓶机平板划线培养:在平板(琼脂+液体培养基)划线,放37摄氏度培养箱培养箱中倒置培养6小时~12小时,在平板上观察是否形成了单菌落.

 

第三步:摇瓶机挑单菌落:在超净台中挑选典型单菌落,置入10毫升中试管(内有5毫升液体培养基)中,在37摄氏度摇床,转速200转培养12小时或者过夜,肉眼能看到试管浑浊。

 

第四步:摇瓶机按照1:20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液体培养基),培养条件同前。注意:所有的接种操作均需要在层流罩中,培养基应无菌。


以上四步,摇瓶机是一般细菌培养都会涉及到的步骤,有些操作人员在实际摇瓶机试验过程中有时会省略复苏这一环节,直接拿烧热的接种环挑些菌液冰水,在平板上划线培养,等长出菌落后,选取合适的菌落摇瓶机培养。另外,要提醒大家的是:(1)摇瓶机是摇转方式进行混合搅拌,而发酵罐是直接机械搅拌;(2)摇瓶机发酵罐可以取样或者仪表时时检测,但是摇瓶机因为量小不能方便的进行控制和检测


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