细胞脂质过氧的测定

[2015/12/31]

  (一)原理:细胞受到氧化性损伤时,脂质过氧化产物丙二醛(MIZ)A)生成量增多,借此可放映受试物或毒物对细胞损伤的程度。

  (二)材料:
  1.24孔培养板培养的待测细胞与对照组细胞。
  2.TBA-TCA-HCl溶液 用0.125mol/L HCl配制16.8%TCA溶液,即为TCA-HCl溶液。将41.6mg硫代巴比妥酸(TBA)溶于.10ml TCA HCl溶液中,即为TBA-TCA-HCl溶液。

  (三)方法:将细胞刮下来,连同培养液一起经超声或反复冻融使细胞破碎,混匀后取0.3ml,加入2ml TBA-TCA HCl溶液,80℃水浴15min,3000r/min离心10min,取上清液在分光光度计535nm处比色。

  (四)结果与分析:
  
计算受试物组细胞脂质过氧化产物的相对生成量(%)。
  细胞脂质过氧化产物的相对生成量越高,则细胞毒性越低,细胞脂质过氧化产物的相对生成量越低,则细胞毒性越高。

  (五)注意事项:如果吸光度值太低,可将几个复孔的细胞合在一起进行测定,或改用更大的培养器皿培养细胞;也可半量测定, リンク: http://web.sgihara.comナイキ 通販 ナイキ エアジョーダン 激安 モンクレール 通販 即取细胞裂解液0.15ml,加1ml TBA—TCA—HCl溶液。