液相小常识

[2012/11/8]

　　一、试验过程中出现气泡的原因

　　1、浸在流动相中的过滤器脏了会导致不断气泡产生，或者输液不畅。解决方法是用浸泡乙醇中用超声波震荡清晰30中，污染严重可先用30%硝酸震荡清洗，再用纯水震荡清洗30分钟

　　2、四氟软管有破裂或褶皱也会产生气泡，同时若四氟软管与泵连接的四氟垫圈密封不好也会产生大量气泡，表现是流动相虽然脱气但还是有大量气泡产生

　　3、流动相液面过低使浸在流动相中的过滤器裸露再空气中也会产生上述情况。

　　二、液相色谱仪的输液泵都有单向阀，单向就是只一个方向通，单向阀故障会导致压力不稳，压力上不去。单向阀故障主要有：

　　1、单向阀被异物堵塞，吸不上液。解决办法是用超声波清洗单向阀组件。

　　2、单向阀两相都通，压力上不去。解决办法重装单向阀或向厂家求助。

　　3、单向阀内有气泡，表现是压力上不去，或不稳，解决办法用大流量冲洗单向阀(6ml/min).

　　4、单向阀泄露，要更换密封装置。柱压不稳不一定来自色谱柱。要了解单向阀的结构(说明书一般都有介绍)

　　三、缓冲液应用的几点建议

　　缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和ph值，减少拖尾。但是使用缓冲液要注意几点：

　　1、避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。

　　2、缓冲液最好要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。

　　3、实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞，可用95：5的水甲醇冲洗。

　　4、使用缓冲液要及时掌握ph范围，做到胸中有数。

　　5、清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。

　　6、长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路(拆下柱子，走30ml,再用5倍水冲洗)可以避免液路的堵塞。

　　7、选择缓冲液要用可靠的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。

上一篇：培养方法：鼠肝细胞原代

下一篇：液相色谱常用的符号与术语