血浆游离血红蛋白测定

[2014/1/15]

　　实验原理

　　血红蛋白具有类过氧化物酶活性，可催化H2O2释放新生态氧，使邻甲联苯胺氧化发生颜色变化，由无色最终变为蓝紫色。根据显色深浅与标准进行比较，可测出其含量。

　　实验方法

　　材料：

　　1.2g/L邻甲联苯胺溶液

　　2.1%H2O2

　　3.10%醋酸溶液

　　4.分光光度计

　　方法：

　　1.抽取静脉血2-3ml，枸橼酸钠抗凝，离心分离血浆。

　　2.按下表进行操作，用分光光度计，波长为530nm，以空白管调零，测定测定管的吸光度。

　　试剂 (ml)测定管空白管

　　2 g/L邻甲联苯胺溶液0.50.5

　　患者血浆0.02/

　　1% H2O20.50.5

　　混匀后室温放置10min

　　10%醋酸溶液5.05.0

　　室温放置10min

　　3.计算公式

　　血浆游离Hb(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100

　　实验结果计算

　　参考范围：0-40mg/L

　　注意事项

　　1.一切容器避免血红蛋白污染;

　　2.采血要顺利，器皿要干燥，检测血浆要新鲜，及时分离，防止人为溶血;

　　3.邻联苯胺溶液具致癌性，检测时要小心，废液要妥善处理，以免污染;

　　4.双氧水要新鲜配置，浓度要准确。

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