HPLC系统关键部件的选择与优化

[2024/5/23]

一、输液泵的选择与优化

输液泵,作为HPLC(高效液相色谱)系统的心脏,其性能直接决定了整个系统的稳定性和分析结果的可靠性。在选择输液泵时,我们需要考虑以下关键性能:

  1. 流量稳定性:RSD(相对标准偏差)应小于0.5%,这对于确保定性和定量分析的准确性至关重要。
  2. 流量范围:分析型输液泵应具备0.1至10 ml/min的连续可调范围,而制备型则能达到100 ml/min或更高。
  3. 输出压力:一般应能达到150至300 bar(约1500至3000 kg/cm²),以确保在各种色谱柱和流动相条件下均能稳定运行。
  4. 液缸容积:优先选择液缸容积小的泵,便于清洗和更换流动相,特别适用于再循环和梯度洗脱。
  5. 密封与耐腐蚀性能:泵应具有良好的密封性和耐腐蚀性能,以确保长期稳定运行。

在泵的类型选择上,目前应用最多的是柱塞往复泵。其优点包括液缸容积小、流量调节方便、泵压高等。为克服其输出的脉冲性,可采用双泵系统(并联或串联)。并联式双泵在流量重现性上表现更佳,但价格较高,且故障率相对较高。

二、进样器的选择与优化

进样器是HPLC系统中连接样品和色谱柱的桥梁,其性能同样关键。在选择进样器时,我们需要关注以下方面:

  1. 密封性:进样器应具有良好的密封性能,以防止样品泄漏和污染。
  2. 死体积:较小的死体积有助于提高柱效和分离度。
  3. 重复性:进样器的重复性直接影响分析结果的可靠性。
  4. 进样方式:HPLC进样方式包括隔膜进样、停流进样、阀进样和自动进样等。不同的进样方式适用于不同的分析需求。
  • 隔膜进样:适用于常规分析,但不适合高压条件,且存在记忆效应和耐溶剂问题。
  • 停流进样:可避免高压进样,但存在“鬼峰”和保留时间不准的问题。
  • 阀进样:耐高压、进样量准确、重复性好,是HPLC分析中常用的进样方式。
  • 自动进样:适用于大批量样品的常规分析,可大幅提高分析效率。

综上所述,在选择和优化HPLC系统的关键部件时,我们需要综合考虑其性能、适用范围和成本等因素,以确保系统的高效、准确和稳定运行。


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